CD19-CAR-T细胞

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科研细胞系列

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产品描述

一、产品介绍
产品名称：CD19-CAR-T细胞
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CAR-T细胞是嵌合抗原受体T细胞。它是通过基因转染技术，使患者的T淋巴细胞携带能识别肿瘤细胞上的某种抗原，进而使T淋巴细胞能选择性地杀死肿瘤细胞。CD19是B细胞表面广泛表达的抗原，在B细胞恶性肿瘤（如B-ALL、DLBCL）中高度表达，但在造血干细胞和其他组织中不表达，使其成为理想靶点。CAR的scFv（单链抗体可变区）可高特异性结合CD19，减少脱靶效应。其核心在于基因改造的T细胞能够特异性识别并杀伤表达CD19的B细胞恶性肿瘤。
二、质量标准
本实验室采用CD19 CCAR基因通过T2A序列串联截短型EGFRt基因，经慢病毒感染T细胞，制备成携带安全开关EGFRt的CD19-CAR-T细胞。
三、使用方法
T 细胞是悬浮细胞，细胞呈聚团生长状态，在标准操作流程下，细胞可培养5-7天；建议收到细胞后尽快进行相关实验。
收到细胞后，请按以下方法进行操作：
1. 解冻：用镊子将冻存管浸于37℃水浴中；反复摇晃，迅速完成解冻；
2. 离心：喷洒75%酒精消毒后，在无菌环境下，打开冻存管，用移液器将细胞连同冻存液移至含5mL完全培养基的15mL离心管中，室温1200rpm离心5min，细胞沉于离心管底部；
3. 接种：将上清液吸除，加1mL完全培养基，轻柔悬起细胞，取样进行细胞计数，然后根据计数结果使用完全培养基将细胞重悬至2-3×10⁶/mL。将所有细胞悬液移适当体积的培养瓶中，于37℃，5%CO₂培养箱中培养；
4. 观察：每日观察细胞生长状态（培养基颜色、形态与密度等）并拍照。
5. 培养：培养基颜色变黄或根据细胞计数结果补液，补液后细胞密度控制在1.5-2×10⁶/mL，每2-3天补液。